对于高效液相色谱仪本身一般不会有问题。对于高效液相色谱仪本身其实最重要的是对于新仪器的校验,因为对仪器进行定期的内部校验,对于保证高效液相色谱仪的正常可运行是非常必要的。下面创想仪器GLMY小编整了几点在使用高效液相色谱仪过程中的注意要点。
1.液相安装环境:
高效液相色谱仪应尽量安装于水平、远离振动、电磁干扰的屋内的台面上,有条件的话尽量将液相数据处理系统分隔开,一个是防止色谱基线噪音偏大,基线不稳等,另一个是为减少对人体的危害。
高效液相色谱仪安装环境
2.色谱条件:
色谱条件一般包括色谱柱、流动相、流速、检测波长及进样量。
(1)色谱柱会因不同的品种而有不同的要求,但每根色谱柱都有它的清洗要求,这个在色谱柱说明书上都可以找到,一定要根据上面的要求进行,否则会造成色谱柱效下降和色谱柱的使用寿命缩短。
(2)流动相就涉及到配制流动相所用到的水和试剂试液,水一般要求用超纯水或其他水的电阻率不大于18.2兆欧级别,试剂试液要求用色谱级别的,原因为防止水和试剂试液中的杂质对色谱结果的干扰。
高效液相色谱仪色谱柱
(3)流速也因品种的不同而不同,一般为1.0ml/min,流速是不可随意改动的,特别是作为QC人员,但是作为研发人员,有时为了摸索条件或进行方法耐用性验证,会对流速进行改变以评价方法的适用性。
(4)检测波长也会因品种的不同有不同的要求,这里需要指出的是要注意观察检测器氘灯能量的变化,比如基线波动大,活性成分的响应值突然变小等,都有可能是氘灯的能量不足所引起的,氘灯一般建议使用800小时,但实际上使用时间不止,可根据实际情况更换。
(5)对于进样量因不同的品种也有不同规定,进样量这块现在都使用自动进样,所以进样精密度都很好,不需强调什么。
3.操作:
首先,作为高效液相色谱仪操作人员,一定要认真学习夜想的说明书,掌握高效液相色谱仪硬件和软件的操作,掌握日常的维护保养,掌握最基础故障的排除和维修。
一般高效液相色谱仪的操作规程也是有操作人员起草的,所以只要严格按照操作要求进行操作,一般不会出现问题,当然这里需要特别指出的是对于高效液相色谱仪的日常维护保养很重要,比如流动相的过滤、脱气、泵密封垫的清洗、系统管路的清洗、溶剂过滤头的清洗等,倘若不坚持,很容易导致色谱柱堵塞、系统压力过大、色谱峰异常等不必要的故障,浪费时间。
其次,操作人员在配制高效液相色谱仪分析用样品溶液时,最好由同一个人单独完成,以免不必要的偶然误差。
在操作高效液相色谱仪时注意以上几点关键因素能是您的分析操作起到事半功倍的作用。