高效液相色谱仪是由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。高效液相色谱仪作为一种常用的分析方法一样，不可能十全十美，作为使用者在掌握了高效液相色谱仪的特点，使用范围和局限性的前提下，充分利用高效液相色谱仪的特点，就可在解决实际分析任务中发挥重要的作用。  

一、高效液相色谱仪的应用范围

高效液相色谱仪适于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定易分解的、分子量大、不同极性的有机化合物;生物活性物质和多种天然产物;合成的和天然的高分子化合物等。它们涉及石油化工产品、食品、合成药物、生物化工产品及环境污染物等，约占全部有机化合物的 80%。其余 20%的有机化合物，包括永久性气体，易挥发低沸点及中等分子量的化合物，只能用用气相色谱仪进行分析。

高效液相色谱仪

二、高效液相色谱仪方法的局限性

高效液相色谱仪虽具有应用范围广的优点，但也有下述局限性。

第一、高效液相色谱仪也不能代替中、低压柱色谱法，在 200kPa 至 1MPa 柱压下去分析受压易分解、变性的具有生物活性的生化样品。

第二，在高效液相色谱仪中，使用多种溶剂作为流动相，当进行分析时所需成本高于气相色谱仪。且易引起环境污染、当进行梯度洗脱操作时，它比气相色谱仪的程序升温操作复杂。

第三、高效液相色谱仪不能替代气相色谱仪，去完成要求柱效高达 10 万块理论塔板数以上，必需用毛细管气相色谱仪分析组成复杂的具有多种沸程的石油产品。

第四、高效液相色谱仪中缺少如气相色谱仪中使用的通用型检测器(如热导检测器和氢火焰离子化检测器)。近年来蒸发激光散射检测器的应用日益增多，有望发展成为高效液相色谱仪的一种通用型检测器。